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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章Polysciences轉(zhuǎn)染試劑如何儲(chǔ)存

Polysciences轉(zhuǎn)染試劑如何儲(chǔ)存

更新時(shí)間:2025-10-11點(diǎn)擊次數(shù):346

轉(zhuǎn)染試劑是分子生物學(xué)與遺傳學(xué)領(lǐng)域中的小幫手。在它的幫助下,科研人員可以將外源基因如DNARNA導(dǎo)入到細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。然而,為了保證高轉(zhuǎn)染效率并保護(hù)細(xì)胞不受破環(huán),正確的使用和儲(chǔ)存轉(zhuǎn)染試劑是至關(guān)重要的。不當(dāng)?shù)谋4婵赡軙?huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染試劑的性能有所下降,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本文將探討Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的保存條件、如何正確儲(chǔ)存該轉(zhuǎn)染試劑以及實(shí)驗(yàn)中可能會(huì)遇到的問(wèn)題。

 一、 保存條件與正確儲(chǔ)存方法

正確的儲(chǔ)存是保證PEI轉(zhuǎn)染效率和使用壽命的基石。

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1.  儲(chǔ)存溫度:

       未滅菌的粉末或濃縮液: 應(yīng)長(zhǎng)期保存在 -20°C。這是最關(guān)鍵的一點(diǎn),可以最大限度地保持其活性和穩(wěn)定性。

       已過(guò)濾除菌的工作液(如1 mg/mL): 可以在4°C保存,也可以在-20°C保存。

           4°C保存: 方便使用,避免了反復(fù)凍融。在4℃下可以穩(wěn)定保存數(shù)月甚至更久。

           -20°C保存: 對(duì)于計(jì)劃長(zhǎng)期儲(chǔ)存(超過(guò)半年)的工作液,建議分裝后存于-20°C,以保持最佳性能。

2.  分裝策略:

       強(qiáng)烈建議進(jìn)行分裝! 無(wú)論是粉末還是配制好的工作液,都應(yīng)根據(jù)您的日常使用量,分裝到無(wú)菌的小管中。

       目的: 避免反復(fù)凍融和細(xì)菌污染。反復(fù)凍融是導(dǎo)致PEI轉(zhuǎn)染效率下降和溶液出現(xiàn)沉淀的主要原因之一。

3.  溶解與配制:

       粉末配制:

           使用無(wú)菌的去離子水(如Milli-Q水)溶解粉末,配制成高濃度儲(chǔ)備液(如10 mg/mL)。

           溶解時(shí),需要用鹽酸(HCl)將pH值小心地調(diào)節(jié)至2.0左右,并加熱(如50-60°C)以幫助其wanquan溶解。

           wanquan溶解后,再用NaOHpH值回調(diào)至7.0。

           最后,必須使用0.22μm的濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌。

       工作液稀釋: 將無(wú)菌的儲(chǔ)備液用無(wú)菌水稀釋成常用的工作液濃度(如1 mg/mL)。同樣需要確保無(wú)菌操作。

4.  穩(wěn)定性:

       在正確儲(chǔ)存條件下(-20°C, 避免反復(fù)凍融),PEI非常穩(wěn)定,可以保存數(shù)年。

 二、 實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問(wèn)題及解決方案

PEI轉(zhuǎn)染的成功依賴于多個(gè)因素的精細(xì)平衡。以下是常見(jiàn)問(wèn)題及其排查方向:

請(qǐng)看《PEI轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問(wèn)題及解決方案

總結(jié): Polysciences PEI是一款強(qiáng)大且經(jīng)濟(jì)的工具,但其成功應(yīng)用依賴于正確的儲(chǔ)存、精確的比例優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化的操作。如果遇到問(wèn)題,請(qǐng)從PEI/DNA比例、DNA純度、細(xì)胞狀態(tài)和復(fù)合物形成過(guò)程這幾個(gè)核心環(huán)節(jié)逐一排查。


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